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La mineralización es el principal mecanismo de disipación del herbicida glifosato (N-[fosfonometil] glicina) en el suelo. Existe escasa información sobre el proceso de mineralización de glifosato en el estrato formado por rastrojos en suelos cultivados en sistema de siembra directa. Las muestras de rastrojos de soja (Glycine max L. Merr.) se obtuvieron inmediatamente después de la cosecha (Soja 1) y cuatro meses después de la cosecha (Soja 2) y las de maíz (Zea mays L.) a los tres meses de su cosecha (Maíz). La evolución de 14C-glifosato y de la actividad microbiana total (TMA) fue monitoreada por liberación de 14C-CO2 y C-CO2 en condiciones de laboratorio, a dos temperaturas, 15 y 28 ºC. El efecto del tamaño de los residuos de cosecha fue evaluado en rastrojo molido (1 mm) y cortado (1 a 2 cm). A los 56 días de incubación del rastrojo de soja se mineralizó 3.9 y 9.9% del 14C-glifosato inicial aplicado a 15 y 28 ºC, respectivamente, mientras que en los rastrojos de maíz la mineralización fue de 2.0 y 3.0%. Se confirmó la naturaleza cometabólica de la mineralización de glifosato. Se detectó una relación inversa entre la relación C/N y el porcentaje de 14C-CO2 liberado. Sobre residuos frescos, con mayor TMA, incrementó la mineralización de glifosato. Aplicaciones de glifosato sobre rastrojos más viejos podrían incrementar la persistencia del herbicida en sistemas de siembra directa.